母犬繁殖排卵最适交配期的测定方法

JACK

母犬的发情周期间隔时间平均为6个月，一旦发情错过交配，则会延误繁殖周期，造成繁殖率的降低。因此，发展一种快速、简便、可靠的母犬发情鉴定和排卵预侧技术，对于提高母犬繁殖力是十分必要的。
         采用母犬阴道涂片检侧角化上皮细胞变化以预侧确定母犬发情周期，其准确性和可
靠性曾有争议。Evans等(1993)认为阴道上皮细胞角化的变化状态不能代表母犬的发情变化。
Bouchard等(1991)在正常母犬发情周期中，与检测阴道上皮细胞角化动态同时连续进行血浆
孕酮}LH的RIA和ELISA法侧定，结果发现，二者的变化是一致的，接受交配前4天，角化上皮细胞比例达80%;LH达到峰值，阴道上皮细胞的动态变化母犬发情周期中激素内分泌变化呈线性关系，依据这种相关关系进行适时交配取得了满意的结果。因此，依母犬发情出血时间和“立定反射”及阴道涂片相结合的发情鉴定，可以用于预侧和确定母犬最适交配时间。
          应注意的是，阴道涂片的取样操作对于阴道上皮细胞变化预侧排卵和发情期的准确性
影响很大，若在阴道深部取样，操作时母犬保定良好，涂片计数的上皮细胞数目变化比较规律，反之则不规律，重复性差。染色操作中对涂片的固定亦是一个重要因素。
         母犬阴道涂片经染色后主要可见以下几种细胞成分。
         角化上皮细胞:在整个涂片中为最大的细胞，一般为多角形，边缘不规则。角化细胞的角质化程度不同，着色也不一致。不完全角化的上皮细胞，核膜界限模糊，核周围着色较胞质边缘区深。完全角化的上皮细胞，核完全消失，整个细胞呈均匀的淡红色。有核上皮细胞多呈圆形、四边形或多角形，细胞核染成蓝色，位于细胞中央，轮廓特别清晰。细胞质染成淡红色。
         白细胞:采用两种染色方法，白细胞核均为蓝色，细胞质为淡红色。
         红细胞:采用两种染色方法，整个红细胞均为淡红色，细胞轮廓较为清晰。
         细胞碎片;分布较为杂乱，呈卷曲的无核细胞碎片，这些碎片可能是由于涂片时取样对上皮细胞的损伤所致，也可能是发情周期中的一些细胞碎片。
         另外，涂片上可见一些粘液干燥后形成的痕迹或其它杂物。